Desenvolvimento de organogel injetável subcutâneo de Pluronic®-F127 e lecitina de soja (OPL) contendo meloxicam para uso veterinário / Development of a veterinary organogel formulation containing soy lecithin, Pluronic® F-127 and meloxicam for the treatment of acute and chronic pain in small animals

O organogel é formado por uma matriz tridimensional composta de filamentos que se auto-organizam em uma rede entrelaçada e que, por seu tipo de estrutura, pode ser utilizado com o objetivo de atuar como um implante que se forma in situ, sendo capaz de se comportar como uma forma farmacêutica de liberação prolongada. Esse trabalho tem, por tanto, o objetivo desse trabalho foi desenvolver, caracterizar, quantificar e traçar perfis de dissolução para formulações de organogel contendo meloxicam como principio ativo. O material está dividido em quatro capítulos, sendo apresentada inicialmente (I) revisão da literatura a respeito da lecitina de origem vegetal, com suas principais fontes de obtenção, como soja, girassol e colza, e também seu uso farmacêutico na obtenção de formulações como organogéis, microemulsões e lipossomas. Os demais capítulos abordam (II) desenvolvimento e otimização de uma formulação de organogel contendo lecitina de soja e Pluronic® F-127 como formadores da matriz tridimensional e meloxicam como principio ativo. (III) Desenvolvimento e validação de um método de quantificação do teor de meloxicam por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). (IV) Desenvolvimento de um método de dissolução para formulações de organogel, que fosse capaz de ser utilizado na caracterização do perfil de dissolução de diferentes formulações. Com os resultados obtidos, foi possível desenvolver formulações de organogel contendo lecitina de soja, Pluronic® F-127 e meloxicam, assim como um método analítico validado para as analises de teor. Por fim, foram obtidos também os perfis de dissolução de duas formulações mais promissoras

Organogels are formed by a three-dimensional matrix composed of filaments that selforganize in an interlaced network and that, due to its type of structure, can be used with the objective of acting as an implant that forms in situ, being able to behave as an extendedrelease dosage form. This work has, therefore, the objective of this work was to develop, characterize, quantify and trace dissolution profiles for organogel formulations containing meloxicam as active ingredient. The material is divided into four chapters, initially presented (I) review of the literature on lecithin of plant origin, with its main sources of production, such as soybean, sunflower and rapeseed, and also its pharmaceutical use in obtaining formulations such as organogels , microemulsions and liposomes. The remaining chapters address (II) development and optimization of an organogel formulation containing soy lecithin and Pluronic® F-127 as three-dimensional matrix formers and meloxicam as an active ingredient. (III) Development and validation of a method for quantification of meloxicam content by high performance liquid chromatography (HPLC). (IV) Development of a dissolution method for organogel formulations, capable of being used to characterize the dissolution profile of different formulations. With the results obtained, it was possible to develop organogel formulations containing soy lecithin, Pluronic® F-127 and meloxicam, as well as a validated analytical method for content analysis. Finally, the dissolution profiles of two more promising formulations were also obtained

FT-NIR associado a método quimiométrico para discriminar resíduos de antimicrobianos e antiparasitário no leite / FT-NIR coupled to chemometric method to discriminate antimicrobial and antiparasitic residues in milk

Introdução: O leite é um dos alimentos mais consumidos pelos seres humanos. Proteínas, vitaminas, gordura, carboidratos e sais minerais fazem parte de sua composição e desempenham importantes funções para a nutrição humana. A prática de adulteração no leite é antiga e ainda se faz presente nos dias de hoje em diversos países, inclusive no Brasil. A fim de obter lucro maior, alguns fornecedores costumam adicionar ao leite: água, amido, citrato, ureia, soda cáustica, cloreto de sódio, sacarose, soro do leite, melamina e outros componentes. No entanto, ainda há outro problema, o da contaminação do leite por medicamentos veterinários. Estes podem causar danos à saúde do consumidor e prejuízos para a produção de seus derivados. Objetivo: O presente trabalho propõe uma metodologia que permite detectar de maneira rápida a presença de resíduos de medicamentos veterinários em leites, dentro do limite máximo de resíduos de cada droga. Métodos: Fez-se o uso da espectroscopia no infravermelho próximo por transformada de Fourier associada à análise de componentes principais. A espectroscopia no infravermelho tem sido utilizada não somente para a autenticidade de laticínios, mas para determinar sua qualidade. Resultados: Conseguiu-se detectar resíduos de penicilina, oxitetraciclina e enrofloxacino, e também do antiparasitário ivermectina nas amostras de leites. Conclusão: A metodologia detectou de maneira rápida e precisa os resíduos das drogas analisadas, mesmo em concentrações muito baixas. Assim, é uma opção a outras existentes, já utilizadas para tal objetivo. (AU)

Introduction: Milk is one of the most consumed foods by humans. Proteins, vitamins, fat, carbohydrates and minerals are part of its composition and play important roles in human nutrition. The practice of adulteration in milk is old and is still present today in several countries, including Brazil. In order to obtain a higher profit, some suppliers usually add to the milk: water, starch, citrate, urea, caustic soda, sodium chloride, sucrose, whey, melamine and other components. However, there is still another problem, that of contamination of milk by veterinary medicines. These can cause damage to the health of the consumer and damage to the production of its derivatives. Objective: The present work proposes a methodology that allows to quickly detect the presence of residues of veterinary medicines in milk, within the maximum residue limit of each drug. Methods: The use of spectroscopy in the near infrared by Fourier transform associated with the analysis of principal components was used. Infrared spectroscopy has been used not only for the authenticity of dairy products, but to determine their quality. Results: It was possible to detect residues of penicillin, oxytetracycline and enrofloxacin, and also of the antiparasitic ivermectin in the milk samples. Conclusion: The methodology fastly and accurately detected the residues of the analyzed drugs, even in very low concentrations. Thus, it is an option to other existing ones, already used for this purpose. (AU)

Preparation, characterization, and in vivo evaluation of a polymorphic form of valnemulin hydrogen tartrate

We prepared a polymorphic form of valnemulin hydrogen tartrate (Form I) to overcome the instability and irritating odor of valnemulin hydrochloride that affect its use in the production and application of veterinary drugs. The physicochemical properties of Form I were characterized by scanning electron microscopy, X-ray powder diffraction, infrared spectroscopy, differential scanning calorimetry, and thermogravimetric analysis. The results showed the crystal structure and thermal properties of Form I were very different from those of a commercially available form of valnemulin hydrogen tartrate (Form II). Form I and Form II were more stable than valnemulin hydrochloride after storage under irradiation and high humidity conditions, respectively. The solubility of Form I was 2.6 times that of Form II, and Form I was selected for use in pharmaceutical kinetics experiments in vivo. Compared to valnemulin hydrochloride, after oral administration at a dose of 10 mg/kg in pigs, Form I had similar pharmaceutical kinetic behavior but a slightly higher area under the concentration–time curve from time zero to the last measurable concentration. Consequently, Form I should be suitable for the development of simple formulations and be effective in the clinical application of veterinary drugs.

Producción pecuaria y emergencia de antibiótico resistencia en Colombia: Revisión sistemática / Livestock production and emergency antibiotic resistance in Colombia: Systematic review

El uso extensivo de antibióticos es una práctica comúnmente realizada para aumentar la producción pecuaria. Así, la crianza animal demanda una fuerte presión selectiva para prevenir brotes de infecciones pero que también podría resultar en la emergencia de cepas multidrogoresistentes. El propósito de esta revisión, es documentar la posible contribución de las practicas pecuarias en la emergencia de patógenos zoonóticos que exhiben resistencia a antibióticos en Colombia. Los patógenos resistentes a antibióticos reportados con mayor frecuencia y asociados a alimentos fueron Salmonella sp. y Escherichia coli. Se encontró que el uso no terapéutico y abuso de antibióticos β-lactámicos, macrólidos y tetraciclinas constituyen la mayor presión selectiva. Adicionalmente, se encontraron estudios locales que reportan la contaminación de fuentes ambientales y alimentos con trazas de antibióticos. La aparición de patógenos resistentes a antibióticos de uso veterinario podría ser producto de la precaria implementación de buenas prácticas pecuarias entorno al componente de sanidad animal.

The extensive use of antibiotics is a common practice to increase livestock production. Thus, animal husbandry entails a high selective pressure to control infectious outbreaks which also might result in the emergence of multidrug resistant strains. This review's aim is to survey cases associated with zoonotic pathogens showing antibiotic resistance in Colombia. The resistant pathogens most commonly isolated from the food chain were Salmonella sp. and Escherichia coli. The nontherapeutic and abuse of antibiotics such as β-lactams, macrolides and tetracycline represented the most critical selective pressure. Furthermore, environmental and food contamination with traces of antibiotics have been found in different local studies. Rise of resistant pathogens to veterinary drugs might result due poor implementation of good farming practices in the animal health plan.

Hypercalcemia and acute renal insufficiency following use of a veterinary supplement / Hipercalcemia e insuficiência renal aguda após uso de suplemento veterinário

Abstract A previously healthy 24 yo male presented with a two-month history of epigastric pain, nausea, vomiting, fatigue and malaise. He reported abuse of different substances, including an injectable veterinary vitamin compound, which contains high doses of vitamin A, D and E, and an oily vehicle that induces local edema and enhances muscle volume. Serum creatinine was 3.1 mg/dL, alanine transaminase 160 mg/dL, aspartate transaminase 11 mg/dL, total testosterone 23 ng/dL, 25-OH-vitamin D >150 ng/mL (toxicity >100), 1,25-OH-vitamin D 80 pg/mL, vitamin A 0.7 mg/dL, parathormone <3 pg/mL, total calcium 13.6 mg/dL, 24-hour urinary calcium 635 mg/24h (RV 42-353). A urinary tract ultrasound demonstrated signs of parenchymal nephropathy. The diagnosis was hypercalcemia and acute renal failure secondary to vitamin D intoxication. He was initially treated with intravenous hydration, furosemide and prednisone. On the fifth day of hospitalization a dose of pamidronate disodium was added. The patient evolved with serum calcium and renal function normalization. Thirty days later he presented normal clinical and laboratory tests, except 25-OH-vitamin D that was persistently increased (107 ng/mL), as it may take several months to normalize. This case report is a warning of the risks related to the use of veterinary substances for aesthetics purposes.

Resumo Um paciente de 24 anos do sexo masculino, previamente hígido, apresentou-se com uma história de dois meses de dor epigástrica, náuseas, vômitos, fadiga e mal-estar. Ele relatava abuso de diferentes substâncias, incluindo um composto vitamínico veterinário injetável contendo altas doses de vitamina A, D e E, e um veículo oleoso que induz edema local com aumento de volume muscular. A creatinina sérica estava 3,1 mg/dL, alanina transaminase 160 mg/dL, aspartato transaminase 11 mg/dL, testosterona total 23 ng/dL, 25-OH-vitamina D > 150 ng/mL (toxicidade > 100), 1,25-OH-vitamina D 80 pg/mL, vitamina A 0,7 mg/dL, paratormônio < 3 pg/mL, cálcio total 13,6 mg/dL, cálcio urinário de 24h 635 mg/24h (VR 42-353). Uma ultrassonografia do trato urinário demonstrou sinais de nefropatia parenquimatosa. O diagnóstico foi hipercalcemia e insuficiência renal aguda secundária a intoxicação por vitamina D. Ele foi tratado inicialmente com hidratação intravenosa, furosemida e prednisona. No quinto dia de hospitalização uma dose de pamidronato dissódico foi adicionada. O paciente evoluiu com normalização do cálcio sérico e da função renal. Trinta dias depois ele apresentou testes clínicos e laboratoriais normais, exceto a 25-OH-vitamina D que estava persistentemente elevada (107 ng/mL), já que ela pode demorar vários meses para normalizar. Este relato de caso é um alerta aos riscos relacionados ao uso de substâncias veterinárias para fins estéticos.

Climate conditions associated with the occurrence of antimicrobial and macrocyclic lactone residues in bulk tank milk / Condições climáticas associadas à ocorrência de resíduos de antimicrobianos e lactonas macrocíclicas em amostras de leite de tanque

The present study aimed to identify the climate condition parameters that are associated with the occurrence of antimicrobial and macrocyclic lactone residues in bulk tank milk using a multivariate principal components analysis (PCA). A total of 132 raw milk samples were collected at dairy farms in Minas Gerais State in Brazil and analyzed for 35 analytes, comprising macrocyclic lactones and antibacterials, using liquid chromatography coupled with mass spectrometry in tandem mode spectrometry. Of the 132 samples, 34 (25.76%) bulk tank milk samples were positive for at least one analyte. PCA showed that antimicrobial residues in bulk tank milk occurred less frequently on days with a higher average temperature, maximum temperature and temperature-humidity index. In contrast, relative humidity was inversely associated with antimicrobial residues in raw milk. The PCA showed that daily milk production was also related to macrocyclic lactone residues, while rainfall showed an inverse association. Thus, some climate conditions, such as average temperature, maximum temperature and temperature-humidity index, can predict the moments with lower risk of occurrence of antimicrobial residues in bulk tank milk, in contrast to relative humidity. Furthermore, the risk of macrocyclic lactone residues in bulk tank milk was higher in months with less rainfall.(AU)

O presente trabalho objetivou identificar fatores climáticos associados à ocorrência de resíduos de antimicrobianos e lactonas macrocíclicas em amostras de leite de tanque por análise multivariada de componentes principais (ACP). Para o presente trabalho, 132 amostras de leite cru foram coletadas em fazendas leiteiras localizadas no estado de Minas Gerais (Brasil) e analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência e espectrometria de massas in tandem para detecção de 35 analitos, incluindo antimicrobianos e lactonas macrocíclicas. Das 132 amostras de leite analisadas, detectou-se pelo menos um analito em 34 (25,76%) amostras. A ACP demonstrou que a presença de resíduos de antimicrobianos no leite de tanque ocorreu menos frequentemente nos dias com maior temperatura média, temperatura máxima e índice de temperatura e umidade. Por outro lado, a umidade relativa foi inversamente associada à presença de resíduos antimicrobianos no leite. A ACP demonstrou associação entre a presença de resíduos de lactonas macrocíclicas no leite e a produção diária de leite, e a presença de resíduos de lactonas macrocíclicas ocorreu menos frequentemente nos meses com maiores índices pluviométricos. Dessa forma, conclui-se que alguns índices climáticos, como temperatura média, temperatura máxima e índice de temperatura e umidade, podem predizer períodos com maior risco de ocorrência de resíduos de antimicrobianos, em contraste com a umidade relativa. Além disso, o risco de resíduos de lactonas macrocíclicas no leite de tanque foi maior nos meses com menores índices pluviométricos.(AU)

Survey of pyrethroid, macrocyclic lactone and antibacterial residues in bulk milk tank from Minas Gerais State, Brazil / Resíduos de piretróides, lactonas macrocíclicas e antimicrobianos em amostras de leite de tanque no estado de Minas Gerais

A survey of veterinary drug residues in bulk milk tank from Minas Gerais State, Brazil, was carried out through a broad scope analysis. Here, 132 raw milk samples were collected at 45 dairy farms in Minas Gerais from August 2009 to February 2010, and analyzed for 42 analytes, comprising pyrethroids, macrocyclic lactones and antibacterials, using liquid chromatography coupled with mass spectrometry in tandem mode and gas chromatography with electron capture detection. Within all milk samples, at least one veterinary drug residue was identified in 40 milk samples (30.30%) by confirmatory tests, whereas 16 samples (12.12%) showed the presence of at least two residues. With regard to the Brazilian maximum residue levels, 11 milk samples (8.33%) were non-compliant according to Brazilian Legislation. The veterinary drugs detected in the non-compliant milk samples include penicillin V (one sample), abamectin (one sample) and cypermethrin (nine samples). Furthermore, the antibacterial screening methods failed to identify most of the positive samples that were detected by confirmatory tests, leading to a large discrepancy between the screening and confirmatory antimicrobial tests. Thus, the present study indicated that the veterinary drugs residues still represents a great concern for the milk production chain.(AU)

Avaliou-se a presença de 42 analitos, incluindo piretróides, lactonas macrocíclicas e antimicrobianos em 132 amostras de leite de tanque proveniente de 45 propriedades leiteiras localizadas no Estado de Minas Gerais. Para tal, utilizou-se a cromatografia líquida acoplada a espectrofotometria de massas tandem e cromatografia gasosa com detector com captura de elétrons. Dentre todas as amostras de leite, 40 (30,30%) amostras de leite de tanque apresentaram a presença de pelo menos um analito, enquanto 16 amostras (12,12%) de leite demonstraram a presença de pelo menos dois analitos. Considerando os limites estabelecidos pela legislação brasileira, 11 amostras de leite (8,33%) seriam consideradas como não conforme. Ademais, os testes de triagem para detecção de antimicrobianos no leite não conseguiram identificar a maioria das amostras positivas nos testes confirmatórios, levando a grande discrepância entre estes testes. Desta forma, os resultados do presente estudo indicam que os períodos de descarte do leite, especialmente para piretróides, não foram plenamente respeitados por todos os produtores de leite. Além disto, uma discrepância entre os resultados dos testes confirmatórios e os testes de triagem foi observada.(AU)

Resíduos de antimicrobianos em salmão do atlântico (Salmo salar L. 1758): aspectos econômicos, ambientais e sanitários / Antimicrobial residues in Atlantic salmon (Salmo salar L. 1758): economic, environmental and sanitary aspects

A aquicultura é um setor da produção animal que apresenta crescimento em grande escala e, como em todo sistema intensivo, nele também é necessário o uso de medicamentos veterinários, como os antimicrobianos. O uso indiscriminado ou em excesso, porém, pode levar à ocorrência de inúmeras questões de caráter sanitário, entre as quais a possibilidade de seleção de estirpes bacterianas resistentes ao agente originariamente utilizado, o qual tem sua eficácia seriamente reduzida ou anulada e favorecendo, por essa razão, uma série de bacterioses que podem afetar decisivamente a produção e a produtividade da exploração aquícola. O uso incorreto dos antimicrobianos, portanto, põe em risco tanto a saúde animal quanto a humana, já que o homem pode se contaminar por meio de resíduos das substâncias aplicadas, afetando tanto sua saúde quanto a do meio ambiente. Ademais, a economia da produção estará ameaçada, porquanto toda a cadeia produtiva estará depreciada em seu rendimento. O cultivo do salmão do Atlântico (Salmo salar L, 1758) foi tomado como paradigma da situação descrita, sendo o Chile o país produtor referenciado, já que ocupa o segundo lugar no ranking mundial dos produtores de salmonídeos, tendo sua produção exportada para muitos países e sendo o Brasil um de seus importadores. Buscou-se neste trabalho, portanto, balizar os riscos representados pela utilização incorreta dessas substâncias na produção desse salmonídeo, que podem afetar a produtividade da exploração e, ao mesmo tempo, tornar o alimento não tão seguro para o consumidor. Conclui-se que, embora indispensáveis para a produção animal, uma vez que evitam perdas pelo controle das bacterioses, os antimicrobianos devem ser administrados de forma responsável e seguindo um manual de boas práticas, sob risco de, não o fazendo, tornar a exploração economicamente inviável e, sobretudo, comprometendo a saúde do consumidor e do meio ambiente. Compete às autoridades sanitárias, especificamente ao Serviço de Inspeção Federal, do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, zelar para a correta aplicação de tais agentes e, acima de tudo, controlar os seus resíduos nos alimentos de origem animal produzidos.

Buparvaquone nanostructured lipid carrier development: physicochemical and in vitro leishmanicidal performances / Desenvolvimento de carreadores lipídicos nanoestruturados contendo buparvaquona: caracterização físico-química e avaliação da atividade leishmanicida in vitro

Leishmaniases is a group of diseases caused by parasites of the genus Leishmania. The estimated number of deaths from visceral leishmaniases ranges from 20,000 to 50,000 annually. The most common treatment over the past 60 years has been pentavalent antimonials. Besides the doubtful effectiveness, they present several disadvantages such as the need for parenteral administration, large doses, long treatment, severe toxicity and parasite resistance. Buparvaquone (BPQ), a drug used for veterinary treatment of theileriosis, showed promising activity against Leishmania spp. However, due to its low aqueous solubility and bioavailability, it has failed in in vivo tests. The use of nanotechnologies has the potential to overcome these drawbacks due to the following advantages: increase in drug water-solubility, increase in therapeutic efficacy and treatment toxicity reduction. Therefore, the present work aimed the development, optimization, physical-chemical evaluation and in vitro performances of nanostructured lipid carriers (NLC) for BPQ encapsulation. The NLC preparation was performed by high pressure homogenization, and surface response and factorial design were applied to formulation optimization. In vitro dissolution profiles were evaluated in phosphate buffer pH 7.4 with tween 80 0.07% w/v or sodium dodecyl sulfate 1% w/v and simulated body fluid pH 7.4. Cytotoxicity was evaluated in mouse peritoneal macrophages and leishmanicidal activity in L. infantum amastigotes. Six optimized NCL were prepared and they showed solubility improvement from 1.5- fold to 611-fold when compared with free BPQ, depending on the formulation and medium. Dissolution profiles showed the NLC formulation suitability for BPQ regarding oral administration, the release could reach 83.29% of a 4mg dose in 30 minutes for formulation of 175.1 nm, while the free drug could be dissolved only 2.89% of the same dose after 4 hours. Moreover, formulation of 230.7 nm showed 81.42% of drug release in in phosphate buffer pH 7.4 with dodecyl sulfate 1.0% w/v after 30 minutes, while BPQ did not dissolved. Cytotoxicity assay showed the safety of all formulations. The iv CC50 values were close to 500 µM, while the IC50 against amastigotes was only 456.5 nM for free BPQ. Developed NLCs showed an increase in IC50 from 2.0 to 3.1-fold when compared to free drug in the in vitro leishmanicidal evaluation. Therefore, the NLC containing BPQ are a promising alternative for the treatment of leishmaniases as oral and parenteral drug dosage forms. Additionally, they have a potential use for lymphatic targeted drug delivery, which can be an innovative approach for this neglected disease.

Leishmanioses são um grupo de doenças causadas por parasitas do gênero Leishmania. O número estimado de óbitos por leishmaniose visceral varia entre 20.000 e 50.000 por ano. O tratamento mais comum nos últimos 60 anos tem sido os antimônios pentavalentes. Além da eficácia duvidosa, eles apresentam várias desvantagens, como a necessidade de administração parenteral, altas doses, tratamento prolongado, toxicidade severa e resistência parasitária. Buparvaquona (BPQ), um fármaco usado para tratamento veterinário da teileriose, mostrou atividade promissora contra Leishmania donovani. No entanto, devido à sua baixa solubilidade e biodisponibilidade aquosa, falhou em testes in vivo. O uso das nanotecnologias tem o potencial de superar esses obstáculos devido às seguintes vantagens: aumento da solubilidade em água, aumento da eficácia terapêutica e redução da toxicidade do tratamento. Portanto, o presente trabalho objetivou o desenvolvimento, otimização, avaliação físico-química e avaliação do desempenho in vitro de carreadores lipídicos nanoestruturados (NLC) para o encapsulação da BPQ. A preparação do NLC foi realizada por homogeneização de alta pressão e superfície de resposta e planejamento fatorial foram aplicados à otimização das formulações. Os perfis de dissolução in vitro foram avaliados em tampão fosfato pH 7.4 com tween 80 a 0.07% p/v ou dodecilsulfato de sódio 1.0% p/v e fluido corporal simulado pH 7.4. A citotoxicidade foi avaliada em macrófagos peritoneais de camundongos e atividade leishmanicida em amastigotas de L. infantum. Foram preparados quatro NCL otimizados e mostraram melhora da solubilidade de 1,5 a 611 vezes quando comparado com a BPQ livre, dependendo da formulação e do meio. Os perfis de dissolução mostraram a adequação da formulação NLC para BPQ em relação à administração oral. A dissolução pode atingir 83,29% de uma dose de 4.0 mg em 30 minutos para a formulação de 175,1 nm, enquanto o fármaco livre dissolveu apenas vi 2,89% da mesma dose após 4 horas. Além disso, a formulação de 230,7 nm mostrou 81,42% de liberação do fármaco em tampão fosfato pH 7.4 com dodecil sulfato de sódio 1.0% p/v após 30 minutos, enquanto o BPQ não se dissolveu. O teste de citotoxicidade mostrou a segurança de todas as formulações. Os valores CC50 foram próximos de 500 µM, enquanto o IC50 em amastigotas foi de apenas 456,5 nM para BPQ livre. Os NLC desenvolvidos mostraram um aumento no IC50 de 2,0 a 3,1 vezes quando comparado ao;fármaco livre na avaliação leishmanicida in vitro. Logo, as NLC contendo BPQ são uma alternativa promissora para o tratamento de leishmanioses como formas farmacêuticas oral e parenteral. Além disso, eles têm um uso potencial para a sítio-específico ao sistema linfático, o que pode ser uma abordagem inovadora para esta doença negligenciada.

Development of high-performance liquid chromatography methods for the anticoccidials: toltrazuril and diclazuril

This study was undertaken to develop new analytical methods for assessment of anticoccidials. High-performance liquid chromatography (HPLC) was found to be a fast, reliable, and practical method. The anticoccidials used in this experiment were toltrazuril and diclazuril, and the analysis factors were specificity, linearity, accuracy, repeatability, and intermediate precision. The linearity of each anticoccidial was better than 0.99, and the accuracies were 99.5% and 99.1% with relative SD of 0.5 and 0.4, respectively. To assess whether the developed HPLC method could be effectively applied, toltrazuril and diclazuril post-market veterinary products (five products) that are currently sold were tested. The results revealed no non-compliant items and the method was applied successfully. Therefore, the newly developed HPLC method for anticoccidial assessment described in this study may be useful as a reference method in the Korean Standards of Veterinary Pharmaceuticals for the analysis of toltrazuril and diclazuril.

Relação da idade na presença de bactérias resistentes a antimicrobianos em rebanhos leiteiros no Rio Grande do Sul / Age related to the presence of antimicrobial resistant bacteria in twenty one dairy herds in Rio Grande do Sul, Brazil

[...] As bactérias foram isoladas de amostras de leite compostas de todos os quartos mamários de cada vaca após descartar os primeiros três ou quatro jatos de leite. Para acessar os potenciais fatores de risco, características dos animais foram obtidas através de uma entrevista com os produtores. Os exames laboratoriais foram realizados de acordo com as recomendações do National Mastitis Council. Um total de 242 isolados foi obtido de 195 vacas a partir da amostra do rebanho total (251 vacas). A prevalência de infecções foi descrita em grupos de acordo com o perfil epidemiológico: bactérias ambientais, contagiosas e outras. Estas perfizeram 57,3 por cento, 26,3 por cento e 11,2 por cento, respectivamente, dos animais amostrados. Testes de suscetibilidade antimicrobiana contra 12 diferentes antimicrobianos foram realizados em 159 isolados. No total, 30 por cento dos isolados testados mostraram resistência a pelo menos três grupos diferentes de antimicrobianos e foram classificados como multirresistentes. Foram observadas as freqüências mais elevadas de resistência contra a ampicilina para os estafilococos coagulase-negativo, seguida de eritromicina para estafilococos coagulase-positivo e tetraciclina para estreptococos. A análise de regressão logística mostrou uma relação significativa entre a idade das vacas e a presença de estafilococos coagulase-positivo multirresistentes e distribuição de classes diferentes de bactérias nos diferentes estratos etários, o que sugere uma concorrência dinâmica ao longo do tempo (p < 0,05). Animais com três a quatro anos tiveram 13,7 vezes mais chances (IC95 por cento 1,4 - 130,2, p = 0,02) de ter estafilococos coagulase-positivo multirresistentes em comparação com aqueles com dois ou três anos. O tempo de exposição a agentes infecciosos e consequentes terapias sugere uma maior chance de colonização do úbere por patógenos resistentes devido à pressão de seleção repetida durante a vida.

[...] Bacteria were isolated from composite milk samples obtained from all quarters of each cow after discarding the initial three or four streams of milk. To access potential risk factors, animal characteristics were obtained through an interview with the producers. Laboratory tests were done according to National Mastitis Council recommendations. A total of 242 isolates was obtained from 195 cows out of 251 cows sampled. The prevalence of animal infections was described in groups according to the epidemiological profile: environmental, contagious and other bacteria. These were 57.3 percent, 26.3 percent and 11.2 percent, respectively of the sampled animals. Antimicrobial susceptibility tests against 12 different antimicrobials were performed in 159 isolates. Altogether, 30 percent of the isolates tested showed resistance to at least three different antimicrobial groups and were classified as multidrug-resistant. Higher frequencies of resistance were observed against ampicillin to coagulase-negative staphylococci, followed by erythromycin to coagulase-positive staphylococci and tetracycline to streptococci. The logistic regression analysis showed a significant relationship between age of the cows and presence of multidrug-resistant coagulase-positive staphylococci and distribution of different class of bacteria, suggesting a competition dynamic throughout the ages (p < 0.05). Animals with three to four years old had 13.7 times more chances (IC95 percent 1.4 - 130.2; p = 0,02) to have multidrug-resistant coagulase-positive staphylococci compared to those with two to three years. Time of exposure to infectious agents and consequent therapies suggests a greater chance of udder's colonization by resistant pathogens due to repeatedly selection pressure during lifetime.

survey on antibacterial drug usage in dairy farms in Tehran province during 2004-2005

Antibacterial drug use in food-producing animals may be associated with risks to public health. The present survey was carried out due to lack of data on the status of antibacterial drug usage in Tehran Province dairy farms. The purpose of the present study was to investigate the status of antibacterial drug usage in these farms and implementation of the points from public health view. A total of 120 dairy farms in four regions of Tehran province including East [Damavand], South-East [Varamin and Shar-e-Rey], South-West [Shariar and Islamshar] and West [Karaj and Savojbolagh], were surveyed by direct interview using a questionnaire. The mean consumption rate of oxytetracycline and penicillin + streptomycin, 100% and 93.25%, respectively, were the most frequently used antibacterial products in these dairy farms in terms of variety, and a wide range of other antibacterials also showed high percentages of usage. Regarding intramammary formulations, cloxacillin, Dry Cow [DC], with a mean of 82.5%, was shown to be the most frequently used intramammary products in terms of variety. In 47.4% of farms, the orders for antibacterial drugs were issued by non-veterinarians. Also, in a considerable percentage of dairy farms the milk collected from animals receiving antibacterial drugs for mastitis [27.5%] or other infectious diseases [24.2%] were being entered into the milk reservoirs to be used for humans. The principles of rational antimicrobial therapy as well as withdrawal/ milk discard times are not implemented in a great percentage of these dairy farms. This situation may be due to lack of knowledge among dairymen regarding drug use and public health, and inadequate supervision of the veterinary offices of Tehran province

Propuesta de implementación de sistema de vigilancia sanitaria de medicamentos de uso veterimario en etapa postcomercialización / Proposed implementation of health surveillance system for veterinary use drugs on stage postmarketing

El presente trabajo de grado tiene como objetivo general: Proponer la implementación del sistema de vigilancia sanitaria de medicamentos de uso veterinario en etapa postcomercialización en los expendios agropecuarios de los mercados principales del Municipio Bolivariano Libertador, Distrito Capital. Metodológicamente, la investigación se ubicó dentro del paradigma cuantitativo y cualitativo, bajo la modalidad de proyecto factible, de tipo descriptiva y con un diseño de campo. La elección de la muestra respondió al criterio de la investigadora, estuvo representada por el total de la población de los expendios agropecuarios que comercializan en los mercados principales del Municipio Bolivariano Libertador, Distrito Capital. La recolección de datos se realizó a través de la técnica de la entrevista y como instrumento el cuestionario estructurado y una guía de observación durante el segundo trimestre Mayo-Junio 2013. Luego de la aplicación de los procedimientos de análisis a través de la matriz DOFA, se concluye que: los alcances de la acción reguladora del sistema de vigilancia, no responde de manera eficiente al fortalecimiento de los vínculos interinstitucionales para la vigilancia, prevención y control en los expendios agropecuarios. Posterior a ello, se hizo necesaria la elaboración de una propuesta para la implementación del sistema de vigilancia sanitaria de medicamentos de uso veterinario mediante la creación de dos coordinaciones dentro de la dirección de Salud Animal del ente regulador y el diseño de instrumentos de inspección enmarcados dentro de la Ley para dar cumplimiento al objetivo general de la propuesta: Proponer un sistema de vigilancia sanitaria para medicamentos de uso veterinario en la etapa post-comercialización en los expendios agropecuarios de los mercados principales del Municipio Bolivariano Libertador del Distrito Capital..

The present degree work has as general aim: To propose the implementation of the sanitary surveillance system of medicines for veterinary use in the post-marketing stage in the agricultural expenditures of the principal markets of the Bolivarian Municipality of Libertador, Capital District. Methodologically, the investigation was located inside the quantitative and qualitative paradigm, under the modality of feasible project of descriptive type with a field design. The election of the sample answered to the criterion of the investigator, it was represented by the whole population of the agricultural expenditures that commercialize inside the principal markets of the Bolivarian Municipality of Libertador, Capital District. The compilation of the information was performed applying the interview and as a resource the constructed questionnaire and observation guide during the second trimester of the year, May - June, 2013. After the application of the analysis procedures by the SWOT analysis, there concludes that: the goals of the regulatory action of the surveillance system, does not answer in a very efficient way to the strengthening of the interinstitutional links for the surveillance, prevention and control inside the agricultural expenditures. Later, it was necessary the elaboration of a proposal for the implementation of the sanitary surveillance system of medicines for veterinary use by means of the creation of two coordinations Inside the Animal Health Direction of the regulatory entity and the design of inspection instruments framed inside the Law, in order to fulfill the general aim of the proposal: To propose a sanitary surveillance system of medicines for veterinary use in the post-marketing stage inside the agricultural expenditures of the principal markets of the Bolivarian Municipality of Libertador, Capital District.

QuEChERS-HPLC-DAD method for sulphonamides in chicken breast

The development of a QuEChERS-HPLC-DAD method using a Lichrospher 60 RP-Select B column (250 x 4.6 mm x 5 µm) at 40ºC, mobile phase constituted by phosphate buffer:acetonitrile (75:25, v/v) at a initial flow rate of 0.5 mL min-1, increased by 1.2 mL min-1 and at 265 nm is presented for simultaneous determination of sulphadiazine, sulphametoxipiridazine and sulphamethoxazole in chicken breast samples. QuEchERS is inexpensive, fast and easy, and the extraction of the analytes of the matrix was successfully employed. In addition, the method presented linearity, in the range of 25, 50, 100, 150, 175, and 200 µg kg-1, precision, selectivity and sensitivity. The intraday precision (RSD %) for QuEChERS method was between 3.6-10.8 (SDZ), 6.9-14.1 (SPZ) and 1.9-10.9 (SMX) and interday precision (RSD%) was between 1.5-9.7, 1.7-4.1 and 2.1-10.2, respectively. Results of accuracy (bias) were in the range of -8.6 to +11.9 %. Therefore, the validated method is clearly useful for the practical residue monitoring of the drugs evaluated in chicken samples, as all the values were within the acceptable criteria used for food safety. Of 6 samples analyzed, none of them showed contamination of the sulphonamides studied at detectable levels.

O desenvolvimento de um método QuEChERS-HPLC-DAD usando uma coluna Lichrospher RP-60 Select B (250 x 4,6 mm x 5 µm) a 40 ºC, fase móvel constituída por tampão de fosfato: acetonitrila (75:25, v/v) a uma vazão inicial de 0,5 mL min-1, aumentando 1,2 mL min-1 e a 265 nm é apresentado para a determinação simultânea de sulfadiazina, sulfametoxipiridazina e sulfametoxazol em amostras de peito de frango. O QuEChERS é barato, rápido e fácil, e a extração dos analitos da matriz foi empregada com sucesso. Além disso, o método apresentou linearidade, na faixa de 25, 50, 100, 150, 175 e 200 µg kg-1, precisão, seletividade e sensibilidade. A precisão intradia (RSD %) para o método QuEChERS foi entre 3,6-10,8 (SDZ), 6,9-14,1 (SPZ) e 1,9-10,9 (SMX) e a precisão interdias (RSD%) foi entre 1,5-9,7, 1,7-4,1 e 2,1-10,1, respectivamente. Resultados de exatidão (tendenciosidade) foram na faixa de -8,6 a +11,9%. Portanto, o método validado é útil para a monitorização de resíduos de medicamentos avaliados em amostras de frangos, bem como todos os valores estavam dentro dos critérios aceitáveis utilizados para a segurança dos alimentos. De seis amostras analisadas, nenhuma apresentou contaminação de sulfonamidas nos níveis detectáveis estudados.

Comparison between Source-induced Dissociation and Collision-induced Dissociation of Ampicillin, Chloramphenicol, Ciprofloxacin, and Oxytetracycline via Mass Spectrometry

Mass spectrometry (MS) is a very powerful instrument that can be used to analyze a wide range of materials such as proteins, peptides, DNA, drugs, and polymers. The process typically involves either chemical or electron (impact) ionization of the analyte. The resulting charged species or fragment is subsequently identified by the detector. Usually, single mass uses source-induced dissociation (SID), whereas mass/mass uses collision-induced dissociation (CID) to analyze the chemical fragmentations Each technique has its own advantages and disadvantages. While CID is most effective for the analysis of pure substances, multiple-step MS is a powerful technique to get structural data. Analysis of veterinary drugs ampicillin, chloramphenicol, ciprofloxacin, and oxytetracycline serves to highlight the slight differences between SID and CID. For example, minor differences were observed between ciprofloxacin and oxytetracycline via SID or CID. However, distinct fragmentation patterns were observed for ampicllin depending on the analysis method. Both SID and CID showed similar fragmentation spectra but different signal intensities for chloramphenicol. There are several factors that can influence the fragmentation spectra, such as the collision energy, major precursor ion, electrospray mode (positive or negative), and sample homogeneity. Therefore, one must select a fragmentation method on an empirical and case-by-case basis.

Hipercalcemia e lesão renal aguda causadas por abuso de um composto veterinário parenteral contendo vitaminas A, D e E / Hypercalcemia and acute kidney injury caused by abuse of a parenteral veterinary compound containing vitamins A, D, and E

Um rapaz de 19 anos, previamente hígido, procurou o hospital com queixas de anorexia, náuseas e vômitos. Exames laboratoriais revelaram hipercalcemia (valor máximo do cálcio de 14,8 mg/dL) e lesão renal aguda (valor máximo da creatinina de 2,88 mg/dL). O paciente admitiu utilizar uma formulação parenteral de vitaminas A, D e E de uso exclusivo veterinário, contendo 20.000.000 UI de vitamina A; 5.000.000 UI de vitamina D3 e 6.800 UI de vitamina E, por ampola de 100 mL. Ele refere ter usado cerca de 300 mL do produto no último ano. O jovem não estava interessado na quantidade maciça de vitaminas contida no produto, mas apenas no efeito local do veículo oleoso; o edema provocado pela injeção simulava um aumento de massa muscular. O produto, no entanto, foi absorvido e causou hipervitaminose. O nível sérico de 25(OH) vitamina D estava claramente elevado em 150 ng/mL (referência de 30 a 60 ng/mL), mas não tanto quanto em outros casos publicados de intoxicação por vitamina D. A maioria dos casos de hipercalcemia por hipervitaminose D se associa a níveis de 25 (OH)D bem maiores do que 200 ng/mL. O PTH estava indetectável, e outras causas de hipercalcemia foram excluídas. Deste modo, conclui-se que a gravidade da hipercalcemia encontrada neste caso foi resultado do efeito sinérgico da intoxicação pelas vitaminas A e D. O paciente foi tratado com soro fisiológico, furosemida e ácido zolendrônico e evoluiu com normalização rápida dos níveis séricos de cálcio e da função renal.

A previously healthy 19 year-old male presented to the hospital with anorexia, nausea, and vomiting. Laboratory studies were significant for hypercalcemia (peak calcium value of 14.8 mg/dL) and acute kidney injury (peak serum creatinine of 2.88 mg/dL). He admitted to using a parenteral formulation of vitamins A, D and E restricted for veterinary use containing 20,000,000 IU of vitamin A; 5,000,000 IU of vitamin D3; and 6,800 IU of vitamin E per 100 mL vial. The patient stated to have used close to 300 mL of the product over the preceding year. Interestingly, the young man was not interested in the massive amounts of vitamins that the product contained; he was only after the local effects of the oily vehicle. The swelling produced by the injection resulted in a silicone-like effect, which gave the impression of bigger muscles. Nevertheless, the product was absorbed and caused hypervitaminosis. The serum level of 25(OH) vitamin D was clearly elevated at 150 ng/mL (reference range from 30 to 60 ng/mL), but in most published cases of vitamin D toxicity, serum levels have been well above 200 ng/mL. His PTH level was undetectable and other potential causes of hypercalcemia were excluded. Therefore, we posit that the severity of the hypercalcemia observed in this case was the result of a synergistic effect of vitamins A and D. The patient was treated with normal saline, furosemide and zolendronic acid, with rapid normalization of calcium levels and renal function.

Morfometría ultraestructural de la glándula adrenal de ratones infectados experimentalmente con dos aislados venezolanos de trypanosoma evansi / Ultrastructural morphometry of the adrenal gland of mice experimentally infected with two Venezuelan isolates of trypanosoma evansi

Este trabajo describe cualitativamente y analiza cuantitativamente las variaciones ultraestructurales de la glándula adrenal de ratones durante el desarrollo de infecciones murinas experimentales por dos aislados venezolanos de Trypanosoma evansi, uno proveniente de asno y otro de caballo. Las modificaciones submicroscópicas observadas incluyeron alteraciones en el retículo endoplasmático liso, mitocondrias, gotas lipídicas, aparato de Golgi y núcleo. También se apreciaron alteraciones en el número de vesículas de epinefrina, norepinefrina, gránulos de lipofucsina y presencia singular de figuras mielínicas. Estos cambios ultraestructurales estarían asociados a problemas metabólicos que inducirían la muerte de los animales infectados. El estudio cuantitativo demostró diferencias significativas en las características y las magnitudes del daño causado por ambos aislados, siendo el tripanosoma proveniente de caballo más patogénico. El análisis multivariante de los cambios submicroscópicos discriminó la acción patogénica en la glándula adrenal de tripanosomas de la misma especie que provienen de hábitats diferentes (Equus asinus y E. caballus) y de zonas geográficas distintas (estado Apure y estado Guárico).

This work describes qualitatively and analyzes quantitatively the ultrastructural variations of the mice adrenal gland during the development of murine experimental infections by two Venezuelan isolates of Trypanosoma evansi, one de rived from a donkey and another from a horse. The submicroscopic modifications included modifications in the smooth endoplasmic reticulum, mitochondria, lipid droplets, Golgi apparatus, and nucleus. Alterations in the number of epinephrine, norepinephrine vesicles, and lipofuscin granules and singular myelin-like figures were also observed. Such ultrastructural changes would be associated to metabolic problems including the infected animal’s death. The quantitative study demonstrated significant differences in the characteristics and magnitude of the damage caused by both isolates, being more pathogenic the horse derived trypanosome. The multivariate analysis of the submicroscopic changes discriminated the pathogenic action of trypanosomes of the same species coming from different habitats (Equus asinus and E. caballus) and different geographic zones (Apure state and Guarico state) in the adrenal gland.

Studies of ketoprofen toxicity in avian species

Certain environmental factors are very important to stabilize the wild life; avian diseases, vulture crises and ecological annoyance. This should be fixed scientifically to minimize the health hazards. Thus; we have aimed this project to evaluate effects of toxic dosage levels of Ketoprofen in broiler chickens. Two hundred and twenty five [225] healthy broiler chickens were reared upto 28 days and divided into five groups 25 birds in each group. On day 29[th] four groups were medicated twice a day at dose rate of 50 mg/kg body weight respectively intra-muscularly for four days. Feed and water were provided ad libitum. A physical examination, toxicity and mortality rate were recorded daily. Blood samples was drawn to determination the serum values of Aspartate Transaminase [AST], Alanine transaminase [ALT], Uric Acid, Alkaline phosphatase [ALP], and Creatinine. Postmortem performed on day 41 after all samples taken. In second experiment other 100 birds were divided into five groups comprising of 20 birds in each group. One of the groups was injected I/M Ketoprofen 5mg/kg twice a day. Postmortem performed after medication on 5th day. Based on the necropsy findings and biochemical analysis it was found that Ketoprofen was not safe drug in the avian species. Keeping in view the environmental problem [vultures crises] it is recommended that Ketoprofen which has good pharmacological effects in human medicine should be avoided in veterinary practice

Tem veneno na pecuária: riscos associados ao uso de carrapaticidas na pecuária leiteira / It has poison in cattle: risks associated with the use of acaricides in dairy farming

O presente trabalho teve por objetivo caracterizar os riscos relacionados ao uso de pesticidas na pecuária leiteira, em questões relacionadas à legislação, à saúde e à percepção de riscos de trabalhadores dessa atividade, baseando-se em articulaçãometodológica que incluiu: a) revisão sistemática da literatura de referência sobre o objeto da pesquisa; b) análise da legislação correlata (produtos veterinários e agrotóxicos); c) identificação de perigos relacionados a produtos veterinários formulados à base de princípios ativos regulados como agrotóxicos; e d) análise da percepção de riscos de um grupo de trabalhadores da pecuária leiteira. A análise dosresultados do estudo apontou uma situação de especial interesse para o campo da Saúde Coletiva. No que diz respeito aos trabalhadores da pecuária leiteira, a invisibilidade de riscos associados ao manejo de agrotóxicos de uso veterinário aumenta sua exposição epode estar relacionada a diversos problemas de saúde. Esta mesma invisibilidade leva a um negligenciamento do respeito ao período de carência, o que pode indicar risco decontaminação aos consumidores de leite. Parte dos problemas pode estar associado à não-classificação dos inseticidas de uso veterinários como agrotóxicos, o que torna necessária e urgente a discussão do tema.